青霉素鈉 檢測(cè)步驟 中國(guó)藥典
發(fā)表時(shí)間：2023-09-02
本品為(2S，5R，6R)-3，3-二甲基-6-(2-苯乙酰氨基)-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜雙環(huán)[3.2.0]庚烷-2-甲酸鈉鹽。按干燥品計(jì)算，含C16H17N2NaO4S不得少于96.0%。
【性狀】本品為白色結(jié)晶性粉末；無(wú)臭或微有特異性臭；有引濕性；遇酸、堿或氧化劑等即迅速失效，水溶液在室溫放置易失效。
本品在水中極易溶解，在乙醇中溶解，在脂肪油或液狀石蠟中不溶。
【鑒別】(1)在含量測(cè)定項(xiàng)下記錄的色譜圖中，供試品溶液主峰的保留時(shí)間應(yīng)與對(duì)照品溶液主峰的保留時(shí)間一致。
(2)本品的紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜(光譜集222圖)一致。
(3)本品顯鈉鹽鑒別(1)的反應(yīng)(通則0301)。
【檢査】結(jié)晶性 取本品少許，依法檢査(通則0981)，應(yīng)符合規(guī)定。
酸堿度 取本品，加水制成每1ml中含30mg的溶液，依法測(cè)定(通則0631)，pH值應(yīng)為5.0～7.5。
溶液的澄清度與顏色 取本品5份，各0.3g，分別加水5ml使溶解，溶液應(yīng)澄清無(wú)色；如顯渾濁，與1號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液(通則0902第一法)比較，均不得更濃；如顯色，與黃色或黃綠色1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)比色液(通則0901第一法)比較，均不得更深。
吸光度 取本品，精密稱定，加水溶解并定量稀釋制成每1ml中約含1.80mg的溶液，照紫外-可見分光光度法(通則0401)，在280nm與325nm波長(zhǎng)處測(cè)定，吸光度均不得大于0.10；在264nm波長(zhǎng)處有最大吸收，吸光度應(yīng)為0.80～0.88。
有關(guān)物質(zhì) 取本品適量，加水溶解并定量稀釋制成每1ml中約含4mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取1.0ml，置100ml量瓶中，用水稀釋至刻度，作為對(duì)照溶液；精密量取對(duì)照溶液適量，用水定量稀釋制成每1ml中約含1.0μg的溶液，作為靈敏度溶液。照高效液相色譜法(通則0512)試驗(yàn)。用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以磷酸鹽緩沖液(取磷酸二氫鉀10.6g，加水至1000ml，用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.4)-甲醇(72:14)為流動(dòng)相A，乙腈為流動(dòng)相B；檢測(cè)波長(zhǎng)為225nm，流速為每分鐘1.0ml，柱溫為34℃。取青霉素系統(tǒng)適用性對(duì)照品適量，加水溶解并稀釋制成每1ml中約含4mg的溶液，取20μl注入液相色譜儀，先以流動(dòng)相A-流動(dòng)相B(86.5:13.5)等度洗脫，待雜質(zhì)E的第3個(gè)色譜峰(見參考圖譜)洗脫完畢后，立即按下表進(jìn)行線性梯度洗脫，記錄的色譜圖應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)圖譜一致。取靈敏度溶液20μl注入液相色譜儀，主成分色譜峰峰高的信噪比應(yīng)大于10。精密量取供試品溶液與對(duì)照溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。供試品溶液色譜圖中如有雜質(zhì)峰，各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對(duì)照溶液主峰面積(1.0%)。供試品溶液色譜圖中小于靈敏度溶液主峰面積的峰忽略不計(jì)。
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時(shí)間(分鐘) 流動(dòng)相A(%) 流動(dòng)相B(%)
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0 86. 5 13. 5
tg+2 86. 5 13. 5
tg+26 64 36
tg+38 64 36
tg+39 86. 5 13. 5
tg+50 86. 5 13. 5
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tg:青霉素系統(tǒng)適用性對(duì)照品溶液中雜質(zhì)E的第3個(gè)色譜峰的保留時(shí)間。
青霉素聚合物 照分子排阻色譜法(通則0514)測(cè)定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用葡聚糖凝膠G-10(40～120μm)為填充劑，玻璃柱內(nèi)徑為1.0～1.4cm，柱長(zhǎng)為30~40cm，流動(dòng)相A為pH7.0的0.1mol/L磷酸鹽緩沖液[0.1mol/L磷酸氫二鈉溶液-0.1mol/L磷酸二氫鈉溶液(61:39)]，流動(dòng)相B為水，流速每分鐘1.5ml，檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm，量取0.1mg/ml藍(lán)色葡聚糖2000溶液100～200μl，注入液相色譜儀，分別以流動(dòng)相A、B進(jìn)行測(cè)定，記錄色譜圖。理論板數(shù)按藍(lán)色葡聚糖2000峰計(jì)算均不低于400，拖尾因子均應(yīng)小于2.0。在兩種流動(dòng)相系統(tǒng)中藍(lán)色葡聚糖2000峰的保留時(shí)間的比值應(yīng)在0.93～1.07之間，對(duì)照溶液主峰與供試品溶液中聚合物峰與相應(yīng)色譜系統(tǒng)中藍(lán)色葡聚糖2000峰的保留時(shí)間的比值均應(yīng)在0.93～1.07之間。取本品約0.4g，置10ml量瓶中，加0.05mg/ml的藍(lán)色葡聚糖2000溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻。量取100～200μl注入液相色譜儀，用流動(dòng)相A進(jìn)行測(cè)定，記錄色譜圖。高聚體的峰高與單體與高聚體之間的谷高比應(yīng)大于2.0。另以流動(dòng)相B為流動(dòng)相，精密量取對(duì)照溶液100～200μl，連續(xù)進(jìn)樣5次，峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于5.0%。
對(duì)照溶液的制備 取青霉素對(duì)照品適量，精密稱定，加水溶解并定量稀釋制成每1ml中約含0.1mg的溶液。
測(cè)定法 取本品約0.4g，精密稱定，置10ml量瓶中，加水適量使溶解后，用水稀釋至刻度，搖勻，立即精密量取100～200μl注入液相色譜儀，以流動(dòng)相A為流動(dòng)相進(jìn)行測(cè)定，記錄色譜圖。另精密量取對(duì)照溶液100～200μl注入液相色譜儀，以流動(dòng)相B為流動(dòng)相進(jìn)行測(cè)定，記錄色譜圖。按外標(biāo)法以青霉素峰面積計(jì)算，青霉素聚合物的量不得過(guò)0.08%。
干燥失重 取本品，在105℃干燥，減失重量不得過(guò)0.5%(通則0831)。
可見異物 取本品5份，每份各2.4g，加微粒檢査用水溶解，依法檢查(通則0904)，應(yīng)符合規(guī)定。(供無(wú)菌分裝用)
不溶性微粒 取本品3份，加微粒檢査用水制成每1ml中含60mg的溶液，依法檢査(通則0903)，每1g樣品中，含10μm及10μm以上的微粒不得過(guò)6000粒，含25μm及25μm以上的微粒不得過(guò)600粒。(供無(wú)菌分裝用)
細(xì)菌內(nèi)毒素 取本品，依法檢査(通則1143)，每1000青霉素單位中含內(nèi)毒素的量應(yīng)小于0.10EU。(供注射用)
無(wú)菌 取本品，用適宜溶劑溶解，加青霉素酶滅活后或用適宜溶劑稀釋后，經(jīng)薄膜過(guò)濾法處理，依法檢查(通則1101)，應(yīng)符合規(guī)定。(供無(wú)菌分裝用)
【含量測(cè)定】照高效液相色譜法(通則0512)測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以有關(guān)物質(zhì)項(xiàng)下流動(dòng)相A-流動(dòng)相B(70:30)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為225nm；取青霉素系統(tǒng)適用性對(duì)照品適量，加水溶解并稀釋制成每1ml中約含1mg的溶液，取20μl注入液相色譜儀，記錄的色譜圖應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)圖譜一致。
測(cè)定法 取本品適量，精密稱定，加水溶解并定量稀釋制成每1ml中約含1mg的溶液，作為供試品溶液，精密量取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取青霉素對(duì)照品適量，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，其結(jié)果乘以1.0658，即為供試品中C16H17N2NaO4S的含量。
【類別】β-內(nèi)酰胺類抗生素，青霉素類。
【貯藏】嚴(yán)封，在涼暗干燥處保存。
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